【应用】VirexpR实验验证-- Coriolis Compact在病毒空气采样中的性

背景

环境空气质量正日益成为公共卫生领域的关键议题。在大气中存在的各种病原体中，空气传播病毒由于能够快速且隐秘地传播，引发了人们的高度关注。这一事实凸显了加强环境监测与检测体系的必要性。
在此背景下，Coriolis Compact干式气旋采样器完美地满足了这一需求。该设备不仅能够收集微生物（病毒、细菌、真菌），还可捕集无机颗粒（过敏原、微塑料），从而可广泛用于公共卫生监测领域。凭借其轻便紧凑的设计，Coriolis Compact可轻松携带至各类室内外重点区域进行空气采样。本应用说明主要聚焦于Coriolis Compact在病毒采样方面的性能，该性能由独立实验室VirexpR通过实验验证得出。

实验材料

Coriolis Compact（型号 P002055-CORC0-A.0）采样参数：50 L/min，采样10分钟
 SARS-CoV-2病毒（奥密克戎BA5变异株）

方法与实验流程

实验方法
在一个20 m³的测试舱中，均匀喷散固定浓度的体外合成病毒颗粒。随后，使用Coriolis Compact对舱内空气进行采样。采集的样本随后分为两条分析流程：
1.感染性分析流程 ：a、将收集的病毒悬液进行系列稀释后接种至8孔Vero E6易感细胞中。b、经过37°C培养96小时后，通过显微镜观察细胞感染效应。c、计算出IC50值（感染50%细胞所需病毒量），并按采样体积进行归一化处理，得到TCID₅₀/m³指标。                
2.基因组分析流程：a、使用**Qiagen RNeasy Mini Kit（货号74106）**提取病毒RNA。b、采用RT-qPCR检测，针对SARS-CoV-2的**nsp14非结构蛋白（ORF1b-nsp14）**基因设计特异性引物与探针。c、在Applied Biosystems QuantStudio™ 5实时定量PCR系统上分析样品。d、将检测到的基因拷贝数按采样体积归一化，得到copies/m³指标。

实验流程
每个测试循环分为两个阶段（见下图）：
阶段1（对照采样）：在生成病毒气溶胶之前，对测试舱空气进行采样，作为阴性对照。                
阶段2（病毒采样）：在舱内雾化喷散病毒后，经过均化阶段，再使用Coriolis Compact进行采样。采集的病毒样本分别进行感染性分析和基因组拷贝数检测（RT-qPCR）。                
每个阶段2实验均进行三次重复试验，病毒喷散浓度依次为：                
[C/1000]（低浓度）；[C/100]（中浓度）；[C]（高浓度）

采样参数
50 L/min，10分钟。

实验结论
通过上述实验流程，获得了两类定量结果：
1.感染性病毒粒子数量（感染性数据）以TCID₅₀/m³表示，即每立方米空气中足以感染50%细胞的病毒量。
2.总病毒数量（含活性与非活性）（基因组数据）以copies/m³表示，即每立方米空气中检测到的病毒基因组拷贝总数。

实验结果显示：
所有浓度水平（包括极低浓度 [C/1000]）均检测到阳性结果（见下图a、b）。
收集到的病毒总粒子数量与理论预期浓度高度接近，尤其在[C/100]条件下表现最为突出。
图a显示，即使在无收集液体的干式采样条件下，Coriolis Compact仍可有效捕获并维持病毒活性，且病毒存活量与喷散浓度呈正相关。

结 论
独立实验室VirexpR的测试结果充分证明：
Coriolis Compact具备在空气中采样并收集多种浓度下的SARS-CoV-2活性病毒颗粒及其基因组物质的能力。
这突显了其干式气旋采样系统的高效性，非常适用于后续需进行基因组分析或感染性研究的项目。
同时，Coriolis Compact配备最长8小时电池续航，并兼容Coriolis Connect智能应用程序，可实现对病毒及其他微生物传播的精确、可控、可靠监测，为研究特定环境下的病原体扩散提供了强有力的技术支持。